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丹酚酸B检测方法
发布时间:2017-12-20 浏览:

在万众瞩目的淘宝双十一购物节时,阿里巴巴董事局主席马云发布了由他亲自主演的一个短片电影《功守道》,知名影星李连杰、甄子丹、吴京等均有出场。《功守道》为文化类公益短片,旨在宣扬中国传统文化,将太极拳等中华文化瑰宝推向整个世界。其间也穿插了其他的一些中国国粹——在其中的一幕,甄子丹在泡脚时,向水中加入了八味中药:丹参,赤芍,泽兰,王不留行、当归、大黄、牛膝、川芎。这些中药乃是知名药品“丹参泡脚片”的主方,用于足浴,可起到改善血液循环、清心活血、活血通经、消肿祛瘀的功效。

丹参泡脚片的主药是丹参。中药丹参是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎。味苦,微寒。有活血祛瘀,通经止痛,清心除烦,凉血消痈的功效。丹参的主要有效成分包括丹参酮类和丹酚酸等。丹酚酸(salvianolic acid)系丹参的水溶性有效成分,属酚酸类化合物。目前研究较多的有总丹酚酸(totalsalvianolic acid)、丹酚酸Asalvianolic acid A, SalA)和丹酚酸Bsalvianolic acid B, SalB)。

丹酚酸B为水溶性化合物,分子式为C36H30O16,相对分子质量为718.62。丹酚酸B也是丹酚酸的最主要成份。具有抗氧化、保护心脏、保护脑、纤维化、抗肿瘤等作用。下图为丹酚酸B结构式:

           

中国药典(2015版)中对丹参中的丹酚酸B检测作出了规定。RephiLe根据药典与相关文献推出丹酚酸B含量检测解决方案。该方案采用HPLC检测。详细解决方案如下:

一、实验方法

高效液相色谱法(HPLC

二、仪器和试剂

高效液相色谱仪,PURIST Pro超纯水系统

丹酚酸B标注品

三、试验方法

1、色谱条件

采用C18色谱柱,A相为乙腈,B相为0.05%磷酸水,梯度线性改变:0 min19% A81% B15 min23% A77% B30 min25% A75% B40 min90% A10% B。检测波长:286 nm,流速 1.1 mL/min;柱温30℃,进样体积20 μL

2、标准品溶液配制

使用PURIST Pro产超纯水,精准配置浓度为1000 μg/mL的丹酚酸B水溶液,置于棕色容量瓶中。

3、样品溶液制备

称取0.15 g样品粉末置于三角瓶中,加入PURIST Pro产超纯水50 mL,超声处理15 min,过滤,精密量取滤液5 mL,移至10 mL容量瓶中,超纯水定量至刻度。用0.45 μm RephiQuik PES针头式过滤器过滤后得试液。

4、标准曲线

分别精密吸取1000 μg/mL 标准溶液 0.20 mL0.40 mL0.80 mL1.60 mL2.00 mL10 mL容量瓶中,用PURIST Pro超纯水定容。分别进样进行HPLC分析,然后以峰面积为纵坐标,以丹酚酸B的含量为横坐标,绘制标准曲线。

5、试样测定

吸取10 μL试液进行HPLC分析,测定其峰面积,从标准曲线计算得试液中丹酚酸B的含量。

6、结果计算

 

HPLC检测所需要的试剂都应该是色谱纯的试剂,纯水也不例外。乐枫提供的PURIST Pro超纯水系统以纯水为进水,生产超纯水,水质达到或超过GB/T 6682-2008的一级水标准和GB/T 33087-2015的高纯水标准。

 

关于PURIST Pro超纯水仪:

1. 使用两组大容量双管纯化柱,配合乐枫提供的最全系列的配方填料,灵活组合,精准满足用户的特定需求。乐枫的纯化柱耗材包含低有机物型、低硼型、ICP型、低镁型等,适合HPLCGC-MSICP-MS等高要求的仪器用水需求。

2. PURIST Pro采用全氧化法在线检测TOC,不但满足中国药典要求,也符合ISPEUSPTOC检测方式必须通过基于完全氧化法设计的规定。

3. PURIST Pro 可配无线远程控制Rephiblue APP,远程查询纯水系统运行状态,追溯水质历史数据,而且可进行取水分账号管理,最多可设立10个独立账户,满足现代实验室科学管理实验用水,精准核算科研项目成本的要求。

另外,乐枫可提供各类标准所需的中英文3Q 认证和全套验证程序:IQ(安装确认),OQ(操作确认),PQ(性能确认)以及GMPGLP环境下的维护程序,满足制药企业对于验证服务的需求。乐枫还可提供Direct-Pure EDIDirect-Pure RO纯水系统配合PURIST Pro使用,为其提供合格的纯水,并满足实验室的日常清洗等使用。

通常试液上样前需要过滤,除掉试液内的颗粒及微生物,防止色谱柱堵塞、损坏泵等情况发生,保证仪器的操作性能及延长仪器使用寿命。乐枫提供PESNylonPTFE等多种针头式过滤器,适用于各种水相及有机相的样品过滤,保证用户安全使用仪器。

 

 

关于上海乐枫生物科技有限公司

上海乐枫专业从事高端水纯化和实验室分离纯化产品的研发、设计和制造,致力于,为生命科学和生物技术提供精锐品质、高附加值的创新产品。乐枫产品线包括实验室纯水系统、密理博纯水兼容耗材和实验室分离纯化产品。成立十年,乐枫创立出了自己的品牌RephiLe(瑞枫),拥有30多项专利和多个软件著作权。产品销往全球近90个国家和地区。

更多 RephiLe 产品信息,请登陆:www.rephile.cn

RephiLe 企业微信名:乐枫纯水



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